Metode Inaktivasi Virus dengan Binary Ethylenimine (BEI)

Bahan yang dibutuhkan :
2-bromoethylamine Hbr (BEA)
beta-napthol violet (BNV)
Na-Thiosulfate (reagent grade)

BEI 0.001M (1% v/v)
1. Buat larutan 0.7% (0.175 N) NaOH (fresh)
2. Buat larutan stock 1% BNV
3. Dalam setiap liter larutan NaOH ditambahkan 0.5 ml larutan stock BNV sehingga berwarna violet
4. Buat larutan 0.1 M BEA (20.5 gr/l) dalam larutan NaOH (no.3), masukkan dalam waterbath suhu 37 derajat Celcius selama 30-60 menit. Warna akan berubah dalam 15 menit menjadi orange, yang menyatakan bahwa BEA telah berubah menjadi BEI. Larutan ini dapat dipakai jika warna telah berubah menjadi orange
5. Buat larutan Na-Thiosulfat 1 M, kemudian sterilisasi dengan autoclave 121 derajat Celcius selama 15 menit

Inaktivasi
1. Suspensi virus suhu 37 derajat Celcius,pH sekitar 7.4
2. Particle dalam suspensi 1-3 micron, tidak boleh melebihi 3 micron
3. Campur BEI ke dalam suspensi virus sehingga konsentrasi akhir menjadi 0.001 M(1% v/v) dalam 37 derajat Celcius atau suhu kamar pH 7.5-7.6
4. Setelah 1/3 atau 1/4 periode waktu inaktivasi (6 atau 4.5 jam), pindahkan suspensi virus yang sedang diinaktivasi kedalam wadah steril yang lain
5. Pada akhir inaktivasi tambahkan larutan 1 M Na-thiosulfat steril sebanyak 10% dari volume BEI yang dipakai